ELISA隱秘要點之保溫:
在ELISA試劑盒中一般有二次抗原抗體反響,即加標本后和加結合物后,此刻反響的溫度和時刻應按規(guī)則的要求,保溫容器是水浴箱,可使溫度敏捷平衡。各ELISA板不應疊在一起。為防止蒸發(fā),板上應加蓋,或將板平放在底部墊有濕紗布的濕盒中。濕盒應該是金屬的,傳熱簡單。
常有ELISA操作者抱怨試驗復雜,而經驗豐富的老師們會覺得很簡便,一是熟能生巧,二是把握了其間的隱秘。今日上海通蔚生物帶您來看哪些個高品質ELISA試劑盒的操作隱秘吧:
ELISA隱秘要點之加樣:
在ELISA試劑盒中除了包被外,一般需進行45加樣。在定性測定中有時不強調加樣量的性,此刻應該運用相同口徑的滴管,保持的加樣姿勢,使每滴液體的體積根本相同。在定量測定中則加樣量應力求。標本和結合物的稀釋液應按規(guī)則配制。加樣時應將液體加在孔底,防止加在孔壁上部,并留意不可出現(xiàn)氣泡。
ELISA隱秘要點之洗刷:
洗刷在ELISA試劑盒過程中不是反響聚,但卻是決議試驗勝敗的關鍵。洗刷的目的是洗去反響液中沒有與固相抗原或抗體結合的物質以及在反響過程中非特異性吸附于固相載體的攪擾物質。洗刷如不*,特別在zui后一次,如有酶結合物的非特異性吸附,將使空白值升高。別的,在間接法中如血清標本內的非特異性IgG吸附在固相上而未被洗凈,也將與酶標抗體效果而產生攪擾。
ELISA板的洗刷一般可采用以下方法:
1.吸干孔內反響液;
2.將洗刷液注滿板孔;
3.放置2min,略作搖擺;
4.吸干孔內液,也可傾去液體后在吸水紙上拍干。洗刷的次數(shù)一般為3~4次,有時乃至需洗5~6次。
ELISA試驗操作示意圖:
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